液質(zhì)聯(lián)用,又稱液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法,以液相色譜作為分離系統(tǒng),質(zhì)譜作為檢測(cè)器,將液相色譜對(duì)復(fù)雜樣品的高分離能力和質(zhì)譜的高選擇性,高靈敏度的優(yōu)勢(shì)結(jié)合起來,達(dá)到準(zhǔn)確定量分析的目的。液質(zhì)聯(lián)用在藥物研發(fā),環(huán)境分析,食品分析,臨床醫(yī)學(xué)等領(lǐng)域廣泛應(yīng)用,可完成體外、體內(nèi)藥代動(dòng)力學(xué),樣本中分析物含量測(cè)定等。方法學(xué)開發(fā)的目的就是提高分析靈敏度,降低干擾,獲得好的重現(xiàn)性,以達(dá)到準(zhǔn)確測(cè)定生物基質(zhì)中的藥物濃度。
色譜儀Thermo UltiMate 3000 RS,質(zhì)譜儀Thermo TSQ Quantun
①含報(bào)告提供方法檢測(cè)下限,線性范圍(根據(jù)真實(shí)樣本調(diào)整),樣品檢測(cè)結(jié)果,詳細(xì)色譜質(zhì)譜條件,不做多基質(zhì)條件的摸索;②報(bào)告提供方法檢測(cè)下限,上下限的倍數(shù)關(guān)系,詳細(xì)色譜質(zhì)譜條件,不做基質(zhì)條件的摸索。
標(biāo)準(zhǔn)品配制→確定質(zhì)譜條件→確定色譜條件→確定檢測(cè)下限→驗(yàn)證線性范圍
標(biāo)準(zhǔn)曲線配制→樣本前處理→上機(jī)檢測(cè)→數(shù)據(jù)導(dǎo)出、處理
1、細(xì)胞樣本
①細(xì)胞量1×107個(gè),收集細(xì)胞沉淀,-80℃保存,純干冰運(yùn)輸,避免反復(fù)凍融。
②收集時(shí),用預(yù)冷PBS緩沖液清洗三次,去除培養(yǎng)基成分,然后離心去除上清保存。
③如需要進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù),則需送樣前進(jìn)行。
2、全血樣本
①樣本量200 μL,EDTA、EDTA-K2或肝素鈉抗凝,4℃保存,冰袋運(yùn)輸,避免劇烈振蕩和冷凍結(jié)冰。
②由于全血常規(guī)保存期為7天,如需檢測(cè),需要提前至少1周聯(lián)系實(shí)驗(yàn)室確認(rèn)周期情況,以便溝通協(xié)調(diào)安排檢測(cè)。
3、血清、血漿樣本
①樣本量100 μL,-80℃保存,純干冰運(yùn)輸,避免反復(fù)凍融及溶血。
4、尿液樣本
①樣本量200 μL,-80℃保存,純干冰運(yùn)輸,避免反復(fù)凍融及帶入糞便殘?jiān)?br>
5、動(dòng)物組織樣本
①樣本量300 mg,-80℃保存,純干冰運(yùn)輸,避免反復(fù)凍融。
②收集時(shí),用預(yù)冷PBS緩沖液沖洗表面血液,并用濾紙吸干多余水分,避免凍存時(shí)結(jié)冰。
③固定液浸泡過的樣本無法進(jìn)行檢測(cè)。
6、植物組織樣本
①樣本量500 mg,-80℃保存,純干冰運(yùn)輸,避免反復(fù)凍融。
②收集時(shí),用預(yù)冷PBS緩沖液沖洗表面泥沙,并用濾紙吸干多余水分,避免凍存時(shí)結(jié)冰。
③固定液浸泡過的樣本無法進(jìn)行檢測(cè)。