逆轉(zhuǎn)錄病毒（Retrovirus），又稱反轉(zhuǎn)錄病毒，是一種RNA病毒，該病毒呈球形，有包膜，表面有刺突，顆粒直徑為100nm左右。逆轉(zhuǎn)錄病毒基因組有三個基因：gag-編碼病毒的核心蛋白；pol-編碼逆轉(zhuǎn)錄酶；env-編碼病毒的被膜糖蛋白。
逆轉(zhuǎn)錄病毒基因組（圖片來源：Kimball's Biology Pages）
1）逆轉(zhuǎn)錄病毒包裝和純化 逆轉(zhuǎn)錄病毒包裝采用三質(zhì)粒或四質(zhì)粒系統(tǒng)進行包裝，收集細胞培養(yǎng)上清，通過超速離心濃縮純化和收集病毒。
逆轉(zhuǎn)錄病毒包裝流程 逆轉(zhuǎn)錄病毒滴度檢測： 檢測方法：定量PCR檢測干擾后細胞基因組中外源DNA拷貝數(shù)。 實驗原理：慢病毒介導外源基因以逆轉(zhuǎn)錄方式整合進目的細胞基因組。
2）逆轉(zhuǎn)錄病毒侵染細胞過程 逆轉(zhuǎn)錄病毒基因表達時，需在逆轉(zhuǎn)錄酶的作用下首先將RNA逆轉(zhuǎn)錄成DNA，形成DNA整合前復合體，隨后進入細胞核隨機整合到宿主細胞DNA上，經(jīng)過轉(zhuǎn)錄、翻譯，完成基因的表達。
逆轉(zhuǎn)錄病毒作用機制（圖片來源：Kimball's Biology Pages）
3）逆轉(zhuǎn)錄病毒特點 逆轉(zhuǎn)錄病毒的最大特點在于其特異性感染分裂期細胞，這是因為只有當被感染細胞處于細胞分裂期間，逆轉(zhuǎn)錄病毒DNA基因組才能接觸到宿主細胞的遺傳物質(zhì)。 基于上述特性，逆轉(zhuǎn)錄病毒適用于干細胞相關(guān)的大量研究，如神經(jīng)干細胞研究、造血干細胞研究。體內(nèi)應用時，逆轉(zhuǎn)錄病毒適用于研究成年新生神經(jīng)元或膠質(zhì)前體細胞的工作。
表1 不同病毒的生物學特性比較
4）逆轉(zhuǎn)錄應用案例 1、腦室下區(qū)&少突膠質(zhì)細胞前體 客戶發(fā)表文章：Scientific Reports. (IF=4.122). Xiong Y S,et.al. (2015). Early treatment of minocycline alle-viates white matter and cognitive impairments after chronic cerebral hypoperfusion. [逆轉(zhuǎn)錄病毒, 卒中]
注射部位：小鼠側(cè)腦室SVZ區(qū) 載體：pROV-EF1a-GFP 病毒載體：逆轉(zhuǎn)錄病毒 病毒滴度：1× 108 cfu/mL 注射體積：1ul
2、同一細胞分裂的姐妹神經(jīng)元 應用案例：Nature.(IF=41.577).Yu YC,et.al. (2009).Specific synapses develop preferentially among sister excitatory neurons in the neocortex. [逆轉(zhuǎn)錄病毒, 發(fā)育]
注射部位：E12-E13小鼠胚胎 病毒載體：逆轉(zhuǎn)錄病毒 注射體積：1ul
