自噬是細胞利用溶酶體降解途徑進行自我吞食的過程,是細胞在營養(yǎng)不足等壓力情況下維持生存的主要代謝途徑。自噬主要分為三類,即巨自噬(Macroautophagy)、微自噬(Microautophagy)、分子伴侶介導(dǎo)的自噬(Chaperone-mediated autophagy)。自噬在腫瘤、神經(jīng)退行性疾病、心血管疾病等多種疾病中發(fā)揮重要作用。
自噬發(fā)生的過程如下:
圖一 自噬發(fā)生過程自噬產(chǎn)品介紹:
1.自噬篩選系統(tǒng):
GFP-LC3 WT/MT
GFP-LC3-RFP-LC3 MT
Luciferase LC3 WT/Luciferase LC3 MT
圖二 自噬篩選系統(tǒng)
1.自噬檢測系統(tǒng):
單熒光LC3病毒
pLenti-CMV-EGFP-LC3-PGK-Puro
pLenti-Ubc-EGFP-3FLAG-LC3
pLenti-EF1a-GFP-LC3-PGK-Puro
雙熒光LC3病毒
AdV-mCherry-GFP-LC3:高效感染
LV-mCherry-GFP-LC3:穩(wěn)定表達
AAV-mCherry-GFP-LC3:在體檢測Western Blot檢測
LC3 I/II、p62:提供LC3、p62抗體檢測
圖三 自噬檢測系統(tǒng)
2.自噬基因過表達/干擾慢病毒:
干擾慢病毒、3個靶點/基因、干擾效率70%以上
過表達慢病毒、真核表達載體ORF克隆、對應(yīng)檢測抗體圖四 自噬基因操作