CCK-8是一種基于WST-8的廣泛應(yīng)用于細(xì)胞增殖和細(xì)胞毒性的檢測(cè)試劑。WST-8 [化學(xué)名：2-(2-甲氧基-4-硝基苯基)-3-(4-硝基苯基)-5-(2,4-二磺酸苯)-2H-四唑單鈉鹽]，是一種類似于MTT的化合物，它在電子載體1-Methoxy PMS存在的情況下，被線粒體中的脫氫酶還原為具有高度水溶性的橙黃色甲瓚產(chǎn)物（formazan）。顏色的深淺與細(xì)胞增殖成正比，與細(xì)胞毒性成反比。
EdU（5-Ethynyl-2'-deoxyuridine）是一種胸腺嘧啶核苷類似物，其連有的炔烴基團(tuán)在天然化合物中很少見(jiàn)，能夠在DNA復(fù)制時(shí)期代替胸腺嘧啶(T)滲入正在合成的DNA分子中，基于Apollo?熒光染料與EdU的特異性反應(yīng)即可直接并準(zhǔn)確地檢測(cè)出DNA復(fù)制活性，廣泛應(yīng)用于細(xì)胞增殖、細(xì)胞分化、生長(zhǎng)與發(fā)育、DNA損傷修復(fù)、病毒繁殖等方面的研究，尤其適合進(jìn)行siRNA、miRNA、小分子化合物及各種藥物的細(xì)胞增殖及活力篩選實(shí)驗(yàn)。
1. 接種細(xì)胞懸液100μl于96孔板，預(yù)先置于37℃，5% CO2飽和濕度培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)；
2. 每孔內(nèi)加入10μl的CCK-8試劑；
3. 培養(yǎng)板放培養(yǎng)箱內(nèi)孵育1-4小時(shí)；
4. 酶標(biāo)儀測(cè)定450nm波長(zhǎng)度吸光值。
1. 細(xì)胞培養(yǎng)：接種細(xì)胞懸液于96孔板中，培養(yǎng)至正常生長(zhǎng)階段
2. 藥物處理：根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要進(jìn)行各種藥物處理
3. EdU標(biāo)記：用細(xì)胞培養(yǎng)基按1000：1的比例稀釋EdU溶液 (試劑A)，制備適量50μM EdU培養(yǎng)基；
4. 細(xì)胞固定
5. Apollo染色
6. 圖像獲取及分析
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