在正常細胞中,磷脂酰絲氨酸只分布在細胞膜脂質(zhì)雙層的內(nèi)側(cè),細胞發(fā)生凋亡最早期,膜磷脂酰絲氨酸(PS)由脂膜內(nèi)側(cè)翻向外側(cè)。AnnexinV是一種磷脂結(jié)合蛋白,與磷脂酰絲氨酸有高度親和力,碘化丙啶(Propidium Iodide,PI)是一種核酸染料,凋亡中晚期的細胞和死細胞細胞膜通透性的增加,PI透過細胞膜而使細胞核染紅。Annexin V與PI聯(lián)合使用時,PI 則被排除在活細胞(Annexin V-/PI-)和早期凋亡細胞(Annexin V+/PI-)之外,而晚期凋亡細胞和壞死細胞同時被FITC和PI結(jié)合染色呈現(xiàn)雙陽性(Annexin V+/PI+)
收集細胞上清和沉淀→PBS洗滌細胞→熒光標(biāo)記細胞→上機檢測