用免疫磁珠做細(xì)胞分選(MACS)是高效簡(jiǎn)捷的免疫細(xì)胞及其它細(xì)胞的分離純化方法。原理是已包被一抗的磁珠與細(xì)胞表面相應(yīng)分子 特異性結(jié)合,或者已包被二抗(羊抗小鼠或羊抗大鼠)的磁珠與預(yù)先已與細(xì)胞表面分子特異結(jié)合的一抗結(jié)合。磁珠攜帶與之結(jié)合的細(xì)胞吸附于分離柱/試管上,實(shí)現(xiàn)陽(yáng)性細(xì)胞分離或陰性細(xì)胞的分離。
1. 離心收集待分離細(xì)胞,用少量PBE孵育液充分混懸細(xì)胞,加入一抗,4℃孵育30分鐘。
2. 用20倍體積PBE洗細(xì)胞一次,再加PBE充分混懸細(xì)胞后,加入相應(yīng)二抗包被的超微磁珠,混勻后置8~15℃孵育10~15分鐘。
3. 將分離柱安裝入磁場(chǎng)中,加入0.5ml PBE,在重力作用下自然流盡,以預(yù)處理分離柱。