腫瘤細(xì)胞懸浮成球?qū)嶒?yàn)被認(rèn)為是獲取具有干性腫瘤細(xì)胞的試驗(yàn)之一
1. 取對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期細(xì)胞,消化;
2. 用DMEM/F12培養(yǎng)基清洗一遍,棄上清,干細(xì)胞培養(yǎng)液(DMEM/F12作為基礎(chǔ)培養(yǎng)基,添加N2、B27、20ng/ml EGF和20ng/ml bFGF)重懸;
3. 按照1個(gè)細(xì)胞每孔的密度接種至96孔板中,每孔120μL,每隔1d添加20μL干細(xì)胞培養(yǎng)液;
4. 記錄腫瘤球在2周內(nèi)的情況,球徑大于20μm 的球體納入計(jì)數(shù)范圍。