皮膚是人體最大的器官,也是體內(nèi)和外界的屏障,它包含表皮層和真皮層2部分,其中表皮包括基質(zhì)層、棘層、肉芽層、角質(zhì)層;目前燒傷、外科手術(shù)皮膚缺損,慢愈性皮膚病急需新的皮膚替代物,而且皮膚替代物在皮膚病的藥物研究中發(fā)揮重要作用,由于人體真實皮膚模型不可行,動物模型不能針對性代表藥物對人體皮膚的作用,所以體外構(gòu)建3D皮膚模型具有重大意義。
1. 從牛尾和鼠尾中分別提取與純化膠原。
2. 從兒童包皮組織中分離培養(yǎng)原代成纖維細(xì)胞和角質(zhì)細(xì)胞,再以牛尾(或鼠尾)膠原包埋成纖維細(xì)胞,構(gòu)建真皮層。
3. 將角質(zhì)細(xì)胞接種于含鼠尾(或牛尾)膠原包埋的成纖維細(xì)胞上培養(yǎng)7 d,再氣提培養(yǎng)7 d,獲得人工皮膚。