皮膚是人體最大的器官，也是體內(nèi)和外界的屏障，它包含表皮層和真皮層2部分，其中表皮包括基質(zhì)層、棘層、肉芽層、角質(zhì)層；目前燒傷、外科手術(shù)皮膚缺損，慢愈性皮膚病急需新的皮膚替代物，而且皮膚替代物在皮膚病的藥物研究中發(fā)揮重要作用，由于人體真實(shí)皮膚模型不可行，動(dòng)物模型不能針對(duì)性代表藥物對(duì)人體皮膚的作用，所以體外構(gòu)建3D皮膚模型具有重大意義。
1. 復(fù)蘇細(xì)胞時(shí)，從超低溫相中取出凍存細(xì)胞，迅速將凍存管放入提前預(yù)熱的37℃水浴鍋。
2. LPS 誘導(dǎo)的細(xì)胞炎癥模型：首先將LPS稀釋1μg/ml 的工作液，從恒溫培養(yǎng)箱中取出細(xì)胞，在顯微鏡下觀察，更換新的培養(yǎng)液并向細(xì)胞培養(yǎng)液中加入預(yù)先配置好的濃度為 1μg/ml 的 LPS，放入恒溫培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)，至合適的時(shí)間點(diǎn)，進(jìn)行后續(xù)試驗(yàn)。
3. CCK-8檢測(cè)細(xì)胞生存率、Western 蛋白定量檢測(cè)
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