小鼠主動脈內(nèi)皮細胞（mice aortic endothelial cells，MAEC）分離自主動脈組織；主動脈是體循環(huán)動脈的主干。由左心室發(fā)出，起始部有主動脈瓣，可依次分為升主動脈，主動脈弓和降主動脈。降主動脈又分為胸主動脈和腹主動脈。接受左心室搏出的血液，并發(fā)出各級分支將血液運輸?shù)饺砀鹘M織、器官。當(dāng)主動脈病變(如主動脈瘤、主動脈瓣狹窄、主動脈破裂等)時可影響全身血液的供應(yīng)。
1）貼壁細胞傳代：提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱，用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內(nèi)，吸除或倒掉細胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液，加少量PBS潤洗細胞，加入適量胰酶，使胰酶的量能蓋住細胞，37℃孵育，每隔2~3min顯微鏡下觀察，待貼壁細胞間間隙變大、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去胰酶，加入新鮮培養(yǎng)基，晃動細胞瓶，終止胰酶作用，用吸管小心吹打貼壁的細胞，制成細胞懸液。控制吹打的力度，避免產(chǎn)生大量的氣泡，將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內(nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)，隔天觀察貼壁生長情況。
2）懸浮細胞傳代：將細胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi)，1000rpm離心5min，棄去上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，用吸管小心吹散沉淀，制成細胞懸液，將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內(nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)。
