腫瘤 細胞實質(zhì)就是腫瘤。腫瘤組織由實質(zhì)和間質(zhì)兩部分構(gòu)成,腫瘤實質(zhì)是腫瘤細胞,是腫瘤的主要成分,具有組織來源特異性。它決定腫瘤的生物學(xué)特點以及每種腫瘤的特殊性。通常根據(jù)腫瘤的實質(zhì)形態(tài)來識別各種腫瘤的組織來源,進行腫瘤的分類、命名和組織學(xué)診斷,并根據(jù)其分化成熟程度和異型性大小來確定腫瘤的良惡性和腫瘤的惡性程度。腫瘤細胞有三個顯著的基本特征即:不死性,遷移性和失去接觸抑制。除此之外,腫瘤細胞還有許多不同于正常細胞的生理、生化和形態(tài)特征。最為常見和危害性嚴(yán)重的腫瘤為肺癌、鼻咽癌、食管癌、胃癌、大腸癌、肝癌、乳腺癌、宮頸癌、白血病及淋巴瘤等。
一、取材:人腫瘤細胞來自外科手術(shù)或活檢瘤組織。取材部位非常重要,癌性轉(zhuǎn)移淋巴結(jié)或胸腹水是好的培養(yǎng)材料。取材后宜盡快進行培養(yǎng),如因故不能立即培養(yǎng),可貯存于4 ℃中,但不宜超過24 小時
二、培養(yǎng)基:一般常用的RPMI 1640、DMEM、Mc-Coy5A等培養(yǎng)基等皆可用于腫瘤細胞培養(yǎng)。
三、成纖維細胞的排除:成纖維細胞常與腫瘤細胞同時混雜生長,致難以純化腫瘤細胞。而且成纖維細胞常比腫瘤細胞生長得快,最終能壓制腫瘤細胞的生長。因此排除成纖維細胞成為腫瘤細胞培養(yǎng)中的關(guān)鍵。
排除成纖維細胞方法:(1)刮除法;(2)反復(fù)貼壁法;(3)酶消化法。