慢病毒載體（Lentivirus）是一類改造自人免疫缺陷病毒（HIV）的病毒載體，是逆轉錄病毒的一種，基因組是RNA，其毒性基因已經被剔除并被外源性目的基因所取代，屬于假型病毒?？衫媚孓D錄酶將外源基因整合到基因組中實現(xiàn)穩(wěn)定表達，具有感染分裂期與非分裂期細胞的特性。
慢病毒基因組進入細胞后，在細胞漿中反轉錄為DNA，形成DNA整合前復合體，進入細胞核后，DNA整合到細胞基因組中。整合后的DNA轉錄成mRNA，回到細胞漿中，表達目的蛋白；或產生小RNA。慢病毒介導的基因表達或小RNA干擾作用持續(xù)且穩(wěn)定，并隨細胞基因組的分裂而分裂（圖1）。
圖1 慢病毒作用機制
慢病毒載體具有宿主范圍廣，免疫原性低，基因容量大，可以長期表達等特點。能夠有效地感染培養(yǎng)的腫瘤細胞、肝細胞、心肌細胞、神經元、內皮細胞、干細胞等多種類型的細胞。
慢病毒的感染具有整合特性，能夠將外源基因有效地整合到宿主染色體上，達到持久性表達，因而可構建穩(wěn)轉細胞株，用于基因的細胞功能研究。使用慢病毒載體改造T細胞可用于CAR-T細胞治療，CRISPR/Cas9文庫構建使用的也是慢病毒載體。
慢病毒包裝與純化
慢病毒包裝采用三質粒或四質粒系統(tǒng)進行包裝，收集細胞培養(yǎng)上清，通過超速離心濃縮純化和收集病毒。
慢病毒滴度檢測
檢測方法：定量PCR檢測干擾后細胞基因組中外源DNA拷貝數(shù)
實驗原理：慢病毒介導外源基因以逆轉錄方式整合進目的細胞基因組
慢病毒載體優(yōu)勢
① 表達時間長：慢病毒可將外源基因整合到宿主細胞基因組上，實現(xiàn)基因長時間穩(wěn)定的表達，不隨細胞分裂傳代而丟失，是細胞實驗的首選，常用于構建穩(wěn)轉株。
② 安全性高：未發(fā)現(xiàn)致病性，慢病毒載體改造T細胞用于CAR-T細胞治療。
③ 免疫原性低：直接注射活體組織不易造成免疫反應，適用于動物實驗。
不同病毒載體特點
載體選擇
和元上海擁有豐富的慢病毒產品，用于操作編碼基因和非編碼基因，如lncRNA、microRNA、circRNA，如下慢病毒載體可供您選擇（不限于此列表）：
常規(guī)應用
體外感染細胞
慢病毒載體能夠有效地感染培養(yǎng)的腫瘤細胞、肝細胞、心肌細胞、神經元、內皮細胞、干細胞等多種類型原代細胞和大部分細胞系。
慢病毒的感染具有整合特性，能夠將外源基因有效地整合到宿主染色體上，因而可以達到持久性表達，從而構建穩(wěn)轉細胞株，用于基因的細胞功能研究。
慢病毒體外感染細胞的效果圖
常見MOI列表
MOI值：
MOI 是multiplicity of infection 的縮寫，即感染復數(shù)，其含義是感染時病毒與細胞的數(shù)量比值，一般以實驗中某個細胞，感染達到80%，定義為這個細胞的MOI值，即病毒量與細胞數(shù)的比值；加的病毒量(μl)=細胞數(shù)×MOI/滴度(…/ml) ×1000
