服務(wù)介紹：
細(xì)胞凋亡期間基因組DNA被剪切后可能會(huì)形成低分子量的雙鏈DNA片段或者高分子量的單鏈DNA片段，這些受損的DNA片段斷端可通過(guò)酶反應(yīng)修飾核苷酸末端３’-OH被識(shí)別。TUNEL反應(yīng)可將凋亡與壞死及藥物和輻射誘導(dǎo)的DNA鏈斷裂區(qū)分開(kāi)來(lái)。
實(shí)驗(yàn)結(jié)果展示：
實(shí)驗(yàn)過(guò)程：
- 經(jīng)過(guò)固定及透膜后的細(xì)胞用微球菌核酸酶（micrococcal nuclease）或重組DNA酶（Dnaseirecombinant）在15-25℃條件下孵育10 min后再加入TUNEL反應(yīng)液。
- TUNEL反應(yīng)液孵育：樣品中加入50 μl新鮮配置的TUNEL反應(yīng)液后在37℃潮濕環(huán)境中避光孵育60 min，孵育完畢后吸干凈TUNEL反應(yīng)液棄之，加入PBS輕柔沖洗３次；
- 4,6-二脒基-２-苯基吲哚（DAPI）染色：加入配置好的DAPI染液于室溫下孵育10 min吸出。PBS沖洗３次后，加入沒(méi)過(guò)細(xì)胞的PBS保濕；
- 觀(guān)察和分析：光學(xué)顯微鏡下觀(guān)察。
樣本運(yùn)輸要求：
石蠟切片常溫、冰凍切片-20℃、固定后細(xì)胞爬片4℃
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