根據(jù)抗原抗體反應(yīng)和化學(xué)顯色原理,組織切片或細(xì)胞標(biāo)本中的抗原先和一抗結(jié)合,再利用一抗與標(biāo)記生物素等的二抗進(jìn)行反應(yīng),再用標(biāo)記辣根過(guò)氧化物酶(HRP)等的抗生物素結(jié)合,最后通過(guò)呈色反應(yīng)來(lái)顯示細(xì)胞或組織中化學(xué)成分,在光學(xué)顯微鏡下可清晰看見組織細(xì)胞內(nèi)發(fā)生的抗原抗體反應(yīng)產(chǎn)物,從而能夠在細(xì)胞爬片或組織切片上原位確定某些化學(xué)成分的分布和含量。
人浸潤(rùn)性乳腺癌組織免疫組化
1 石蠟切片脫蠟至水→抗原修復(fù)→3%H2O2溶液封閉內(nèi)源性過(guò)氧化物酶→5%羊血清封閉→加一抗→加聚合物輔助劑→加山羊抗兔/小鼠種屬通用型二抗→DAB顯色→蘇木素復(fù)染→脫水透明封片→顯微鏡鏡檢,圖像采集
1、樣本放置于25倍樣本體積的固定液中固定至少24h(切勿固定時(shí)間過(guò)長(zhǎng),切勿冷凍結(jié)冰),常溫運(yùn)輸送樣。
2、石蠟切片常溫運(yùn)輸,冰凍切片-20℃運(yùn)輸。
3、細(xì)胞爬片用固定液浸泡,4℃保存和運(yùn)輸