根據抗原抗體反應和化學顯色原理,組織切片或細胞標本中的抗原先和一抗結合,再利用一抗與標記生物素等的二抗進行反應,再用標記辣根過氧化物酶(HRP)等的抗生物素結合,最后通過呈色反應來顯示細胞或組織中化學成分,在光學顯微鏡下可清晰看見組織細胞內發(fā)生的抗原抗體反應產物,從而能夠在細胞爬片或組織切片上原位確定某些化學成分的分布和含量。
人浸潤性乳腺癌組織免疫組化
1 石蠟切片脫蠟至水→抗原修復→3%H2O2溶液封閉內源性過氧化物酶→5%羊血清封閉→加一抗→加聚合物輔助劑→加山羊抗兔/小鼠種屬通用型二抗→DAB顯色→蘇木素復染→脫水透明封片→顯微鏡鏡檢,圖像采集
1、樣本放置于25倍樣本體積的固定液中固定至少24h(切勿固定時間過長,切勿冷凍結冰),常溫運輸送樣。
2、石蠟切片常溫運輸,冰凍切片-20℃運輸。
3、細胞爬片用固定液浸泡,4℃保存和運輸