在日常病理技術(shù)工作中,常有鈣化、骨化標(biāo)本或骨腫瘤標(biāo)本。由于該組織里存在鈣鹽,妨礙用常規(guī)方法制作良好切片。骨組織及鈣化病灶,經(jīng)過固定后,必先將鈣鹽除去使組織軟化,才能進(jìn)行常規(guī)切片。如脫鈣不全則切片易撕開或碎裂并損傷切片刀刃。脫去鈣鹽的過程,稱為脫鈣。
1. 取材:骨組織固定于10%甲醛溶液24h后再鋸取厚度約0.5cm骨片。
2. 固定:10%甲醛溶液固定2d。
3. 將組織置于脫鈣劑中,每日更換新鮮液、直至組織軟化為止。
4. 流水沖洗24h(除酸)。
5. 進(jìn)行常規(guī)脫水,透明,浸蠟,切片。
1. 骨組織固定24h后,鋸下不超過0.5mm厚度的薄骨片,再以10%甲醛溶液固定后進(jìn)行脫鈣。(未固定的組織在酸性脫鈣液中受到損傷比已固定的組織大3倍)。骨組織過厚則需延長(zhǎng)脫鈣時(shí)間,長(zhǎng)時(shí)間浸于強(qiáng)酸影響切片染色效果。
2. 在不影響診斷條件下,應(yīng)將骨組織周圍的軟組織全部剝?nèi)?。如果切片目的在于觀察骨髓病變或骨組織腫瘤,最好除去一部分正常的致密的骨組織,以利于脫鈣和制片。
3. 脫鈣前最好先將骨組織進(jìn)行脫脂。
4. 脫鈣要徹底,脫水應(yīng)充分,在脫水過程中,要注意不使其過度硬化。